تازه هاي پژوهشي محققان دانشگاه - تولید و بهینه سازی بیان آنزیم استرپتوکیناز نوترکیب در E. coli و بهبود خصوصيات بیوشیمیایی آن با استفاده از روش هاي مهندسي پروتئين

 روابط عمومی دانشگاه علوم پزشکی استان سمنان،

تولید و بهینه سازی بیان آنزیم استرپتوکیناز نوترکیب در E. coli و بهبود خصوصيات بیوشیمیایی آن با استفاده از روش هاي مهندسي پروتئين

اهمیت موضوع: استرپتوکیناز رایج‌ترین و در حال حاضر مقرون به صرفه‌ترین داروی فیبرینولیتیک برای درمان سکته‌های قلبی و گرفتگی رگ‌ها می‌باشددر طی این پژوهش به منظور بهبود ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم استرپتوکیناز، آنزیم به صورت نوترکیب در سیستم باکتریایی اشریشیا کولی بیان گردید.
 مهمترین یافته ها: آنزیم به صورت نوترکیب  و با اعمال چهار جهش به جداگانه عبارت از K36E و R289K و K147H و K332R بیان شد. نتیجه آزمایشات نشان داد جهش K36E اعمال شده ضمن حفظ خصوصیات آنزیمی منجر به افزایش قدرت کاتالیتیکی و اتصال آنزیم سوبسترا گردید. جهت افزایش راندمان تولید آنزیم نوترکیب در باکتری اشریشیا کولی، بهینه سازی شرایط بیان آنزیم با استفاده از روش Response Surface Methodology انجام شد. مقدار بیان آنزیمی استرپتوکیناز نوترکیب از 1853 IU.ml به مقدار 7663 IU/ml رسید (4.14 برابر) در بهینه سازی ترکیبات محیط کشت جهت افزایش بیان خارج سلولی آنزیم استرپتوکیناز با استفاده از روش RSM، مقدار بیان از 802 IU.ml به مقدار 5824 IU/ml (7.1 برابر) افزایش یافت.
 پیشنهاد برای کاربرد نتایج: بهینه سازی شرایط تولید مناسب ضمن حفظ عملکرد انزیم نوترکیب استرپتوکیناز در مقیاس ازمایشگاهی که طی این مطالعه به دست آمد این آنزیم را به عنوان یک کاندید مناسب برای سرمایه گذاری جهت تولید پایلوت و صنعتی مطرح می کند.

دکتر محمدرضا اکبری: mrakbari201177@yahoo.com

طرح تحقیقاتی: 729